溴化氰活化法是常用的活化方法之一,活化過程主要是生成亞胺碳酸活性基團(tuán),它可以和伯氨基(NH2)反應(yīng),主要生成異脲衍生物。
溴化氰活化的基質(zhì)可以在溫和的條件下與配體結(jié)合,結(jié)合的配體量大。利用溴化氰活化的基質(zhì)通過進(jìn)一步處理還可以得到很多其它的衍生物。這種方法的缺點(diǎn)是溴化氰活化法的基質(zhì)和配體偶聯(lián)后生成的異脲衍生物中氨基的pKa=10.4,所以通常會(huì)帶一定的正電荷,從而使基質(zhì)可能有陰離子離子交換作用,增大了非特異性吸附,影響親和層析的分辨率。
另外溴化氰活化的基質(zhì)與配體結(jié)合不夠穩(wěn)定,尤其是當(dāng)與小配體結(jié)合時(shí),可能會(huì)出現(xiàn)配體脫落現(xiàn)象。另外溴化氰有劇毒、易揮發(fā),所以操作不便